• Практическая работа

  • Скачать 39.51 Kb.


    Дата11.07.2018
    Размер39.51 Kb.
    ТипПрактическая работа

    Скачать 39.51 Kb.

    Опыт: Подсчет форменных элементов крови Приборы и материалы



    ОПЫТ: Подсчет форменных элементов крови

    Приборы и материалы. Микроскоп, смеситель для эритро­цитов, смеситель для лейкоцитов, счетная камера Горяева, покровное стекло, часовое стекло, 300 мл 3% раствора NaCl, 300 мл 3% раствора уксусной кислоты, 100 мл 1% раствора метиленовой сини, спирт, эфир, йод, чистая марля, вата, филь­тровальная бумага.

    Практическая работа. Перед употреблением смесители должны быть тщательно вымыты и высушены. Когда на пальце покажется капля крови достаточной величины, погрузить в нее кончик смеси­теля, затем взять резиновую трубку в рот и насосать кровь до метки «0,5» или «1,0». При этом следить, чтобы в капилляр не попали пузырьки воздуха, в противном случае заменить смеси­тель. Кончик капилляра не вынимать из капли до окончания насасывания. Не прижимать смеситель к пальцу, чтобы не закупо­рить отверстие. Стараться не набирать кровь выше указанной метки по окончании набора крови немедленно погрузить кончик капилляра в разбавленную жидкость, которую нужно приготовить заранее. Не выпуская кровь из смесителя, насосать разбавленный раствор (3% раствор NaCl) до метки «101». Кровь и раствор нужно насасывать быстро, но осторожно.

    Закончив набор жидкости, смеситель повернуть в горизон­тальное положение, снять резиновую трубку, закрыть капилляр с обоих концов большим и указательным пальцами и тщательно перемешать жидкость в расширении смесителя. Теперь кровь готова для подсчета эритроцитов.

    Из этой же или из другой капли набрать тем же способом кровь в смеситель для лейкоцитов до метки «0,5» или «1,0». В качестве разбавляющего раствора и одновременно для растворения (гемолиза) эритроцитов употребляется 3% раствор уксусной кислоты. Для того чтобы лучше видеть лейкоциты можно их окрасить, прибавив к уксусной кислоте равный объем 1% раствора метиленовой сини. Набрав кровь, немедленно перенести капилляр в разбавляющий раствор, который насо­сать до метки «11». Как и в первом случае, тщательно переме­шать кровь с разбавляющим раствором, после чего она готова для подсчета лейкоцитов.

    Существует несколько вариантов счетных камер. Наиболее употребляема в клинике камера Горяева. Счетная камера имеет вид толстого предметного стекла, на верхней поверхности которого сделаны три поперечные плоско­сти, разделенные между собой углублениями. Средняя плос­кость ниже обеих крайних на 0,1 мм. Камера Горяева имеет на средней плоскости поперечный желобок. По обе стороны же­лобка или в центре средней плоскости находится квадратная сетка, нанесенная специальной делительной машиной.

    Поместить счетную камеру под микроскоп, при малом уве­личении рассмотреть сетку. Затем перейти на большое увели­чение микроскопа и зарисовать сетку в тетрадь. Сетка камеры Горяева состоит из 225 больших квадратов, 25 из них разделены каждый на 16 маленьких квадратов. Эти квадраты используются для подсчета эритроцитов. Хотя суще­ствует несколько моделей счетных камер, размеры маленьких квадратов всегда одинаковы. Сторона малого квадрата равна 1/20 мм, следовательно, его площадь 1/400 мм2. Если учесть, что высота камеры (расстояние от средней плоскости до покров­ного стекла) равна 1/10 мм, то объем крови над малым квадра­том равен 1/4000 мм3. Площадь всей сетки равна 0,9 мм2.

    Закрыть камеру покровным стеклом так, чтобы не попали пузырьки воздуха, и прижать покровное стекло к край­ним плоскостям камеры. Выпустить из смесителя для эритро­цитов 1-2 капли жидкости на фильтровальную бумагу, поднеся последнюю к кончику капилляра. Следующую каплю приго­товленной крови поместить на счетную камеру. Положить ка­меру на столик микроскопа и под малым увеличением найти сетку. Перевести объектив на большое увеличение и располо­жить малый квадрат в центре поля зрения, все время вращая микрометрический винт. Подсчет провести в 5 больших или 80 малых квадратах. При подсчете учитывать только те эритро­циты, которые располагаются в пределах квадрата и на правой и верхней его сторонах. Эритроциты, оказавшиеся на левой и нижней сторонах квадрата, не учитываются. Порядок подсчета следующий: первый ряд – слева направо, второй ряд – справа налево, третий ряд – слева направо и т. д. Определить количе­ство эритроцитов в каждом квадрате, вычислить среднее. Затем провести пересчет количества эритроцитов в 1 мм3 цельной крови. При этом нужно учесть, что объем малого квадрата ра­вен 1/4000 мм3, кровь разведена в 200 (если она набиралась в смеситель до метки 0,5) или в 100 раз (если набиралась до метки 1,0). Следовательно, умножив среднее число эритроцитов на коэффициент разведения и разделив на объем малого квадрата, мы получим искомую величину, характеризующую количество эритроцитов в 1 мм цельной крови:



    А × 200 × 4000 = Т,

    где А — среднее, 200 — коэффициент разведения, Т — количес­тво эритроцитов в 1 мм3 цельной крови.

    Закончив подсчет эритроцитов, вымыть счетную камеру под проточной водой и вытереть насухо чистой марлей.

    Перейти к подсчету лейкоцитов. Выпустить из смесителя для лейкоцитов одну-две капли на фильтровальную бумагу, следу­ющие капли поместить на счетную камеру, плотно закрытую по­кровным стеклом. Поместить камеру под микроскоп и провести подсчет лейкоцитов на 50 больших квадратах, не разделенных на маленькие. Лейкоциты под микроскопом можно обнаружить в виде прозрачных клеток с ядром синеватого цвета. Для лейко­цитов пересчет на 1 мм3 цельной крови проводится так же, как и для эритроцитов.



    Нужно учесть, что подсчет числа лейко­цитов проводится по той же формуле. Количество лейкоцитов, обнаруженное при подсчете (n), умножить на 100: N = п ×100. Полученное значение (N) будет характеризовать общее количе­ство лейкоцитов в 1 мм3 цельной крови.

    Коьрта
    Контакты

        Главная страница


    Опыт: Подсчет форменных элементов крови Приборы и материалы

    Скачать 39.51 Kb.