• Приготовление
  • Добавки ростовой для легионелл
  • Добавка ростовая для легионелл (кат. № 6022)
  • Добавка GVPC для легионелл (кат. № 6025)
  • Использование
  • Агар триптонно-соевый (кат. № 1138)
  • Микробиологический тест

  • Скачать 27.73 Kb.


    Дата28.05.2017
    Размер27.73 Kb.

    Скачать 27.73 Kb.

    Основа агара для легионелл



    Основа агара для легионелл

    Legionella CYE Agar Base



    Кат. № 1311

    Фасовка 500 г. Срок годности 4 года.


    Хранить при температуре 20°С

    Среда для селективного выделения и культивирования легионелл

    Формула в граммах на литр

    Дрожжевой экстракт 10,0 Активированный уголь 2,0

    Бактериологический агар 13,0

    Конечная величина pH 6,9 ± 0,2 при 25°C



    Приготовление

    Развести 2,5 г среды в 90 мл дистиллированной воды. Нагреть и довести до кипения. Кипятить до полного растворения среды. Разлить в емкости и стерилизовать 15 мин при 121°C. Охладить до 45−50°C и добавить в стерильных условиях 1 флакон Добавки ростовой для легионелл (кат. № 6022), предварительно растворенной в 10 мл стерильной дистилли­рованной воды и, при необходимости, также 1 мл Добавки GVPC для легионелл (кат. № 6025), предварительно растворенной в 5 мл стерильного 50% водного раствора ацетона. Тщательно перемешать и распределить по емкостям. Готовая среда имеет черный цвет и должна храниться при 8–15°C.



    Добавка ростовая для легионелл (кат. № 6022)

    Гидроксид калия 200 мг L-цистеин 40 мг

    Пирофосфат железа 25 мг Буфер ACES 1 г

    Альфа-кетоглутарат 0,1 г

    1 флакон на 100 мл среды

    Добавка GVPC для легионелл (кат. № 6025)

    Полимиксин 39600 МЕ Глицин 1,5 г

    Циклогексимид 40 мг Ванкомицин 0,5 мг

    1 флакон на 500 мл среды



    Осторожно! Добавка GVPC для легионелл содержит циклогексимид и очень токсична при прогла-
    тывании, вдыхании или попадании на кожу. При работе надевать перчатки и за­
    щитные очки/маску.


    Использование

    Основа агара для легионелл и ее добавки оказались оптимальными для культивирования легионелл с относительно короткими инкубационными периодами из проб окружающей среды и клинических образцов.

    Дрожжевой экстракт является источником витаминов, особенно группы В, и других кофакторов роста.
    L-цистеин также является источником питательных веществ. Активированный уголь является протектором, нейтрализующим и адсорбирующим токсичные продукты метаболизма. Он расщепляет перекись водорода, а также может аккумулировать углекислый газ и воздействовать на поверхностное натяжение.

    Инокулировать пробу и инкубировать при 35±2°C 24−72 часа и до 10 дней. Колонии, предположительно являющиеся легионеллами, пересеваются на Агар триптонно-соевый (кат. № 1138) с 5% бараньей крови.

    Изоляты, растущие на агаре для легионелл, но не растущие на триптонно-соевом агаре с кровью, пред­положительно могут считаться легионеллами. Для подтверждения необходимо провести биохимические и серо­логические тесты. Предлагаются следующие критерии: 1) колонии должны иметь характерную морфологию; 2) изоляты не должны расти на триптонно-соевом агаре с кровью; 3) микроорганизмы имеют определенную Грам-морфологию. Колонии L. pneumophila после 48–60 часов инкубации при 35°C: белые, блестящие, округ­лые, гладкие, приподнятые по всему краю, 1–2 мм в диаметре (с увеличением при дальнейшей инкубации). Колонии L. gormanii: кремовые, слизистые, слегка приподнятые, 1−2 мм в диаметре. Колонии других легионелл: белые, блестящие, округлые, гладкие, приподнятые по всему краю, 1−2 мм в диаметре (с увеличением при дальнейшей инкубации).

    Микробиологический тест

    Следующие результаты были получены при использовании тестовых культур на среде с двумя добавками после инкубации при температуре 35±2°C и наблюдались через 24−72 часа и через 10 дней.



    Микроорганизмы

    Рост

    Цвет колоний

    Legionella pneumophila ATCC 33153

    Хороший

    Белый

    Escherichia coli ATCC 25922

    Ингибируется



    Staphylococcus epidermidis ATCC 12228

    Ингибируется



    Коьрта
    Контакты

        Главная страница


    Основа агара для легионелл

    Скачать 27.73 Kb.